復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院采購人***內(nèi)需求論證

發(fā)布日期：******月***日點擊數(shù)量：28次

項目名稱：采購人基因ORF表達文庫項目

預(yù)算：60萬

預(yù)期用途：蛋白表達，基因功能分析

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一、具體需求清單：

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二. 主要技術(shù)指標(biāo)

1. 插入片段

1.1 為指定人源基因名，具體基因名清單見附錄1；

1.2所含ORF至少覆蓋附錄1表格中指定基因名清單中95%的基因，即不少于5660個；

1.3 需要保證不低于85%的質(zhì)粒序列與提供的序列或者官網(wǎng)序列保持一致；

1.4不少于60%的ORF序列與NCBI 2022年10月版本的CCDS庫中的序列或者與NCBI 2022年12月的參考轉(zhuǎn)錄組中的序列具有100%氨基酸匹配；

1.5每一條ORF序列都連接到同一種載體骨架中。

2. 載體骨架

2.1 為pCMV6-Entry真核表達載體，可轉(zhuǎn)化后獲得穩(wěn)定表達細胞株；

2.2 載體具備對全庫序列進行更換載體的特性，如稀有酶切、連接等；

2.3 載體帶有Myc-DDK標(biāo)簽，標(biāo)簽融合于ORF的C端；

2.4 載體帶有CMV強真核啟動子和Kozak2.5 載體帶有真核細胞篩選抗性基因: Neromycin。

2.6載體具體統(tǒng)一的酶切位點：SgfI-MluI?

3. 交貨形式

3.1 實物以凍干粉形式交貨；

3.2 保存在96孔透明細胞培養(yǎng)板中，并用可撕、耐低溫防漏液的封膜封閉；

3.3 每個克隆的提供量不少于10ug；

3.4 除實物外需提供對應(yīng)數(shù)據(jù)清單，隨貨數(shù)據(jù)清單為電子表格或電子表格附帶其他電子文檔。

三. 發(fā)貨及運輸

1. 合同簽訂后12個月內(nèi)提供完全；

2. 隨貨數(shù)據(jù)清單可通過電子郵件或存儲介質(zhì)提供，需在對應(yīng)的實物到貨前一周內(nèi)發(fā)送給甲方單位；數(shù)據(jù)清單每一條數(shù)據(jù)包含但不限于以下內(nèi)容：gene symbol，NCBI accession NO或者BC NO，板編號***style="19px">ORF 完整序列，tag信息，質(zhì)粒骨架名稱，大腸桿菌抗性信息等。

四. 提供的電子報告和驗收標(biāo)準(zhǔn)

1. 產(chǎn)品出廠前需要由廠家負責(zé)以下檢驗：至少對10%的板子進行抽查檢驗，此類板每板抽查不少于5個孔檢驗，驗證方法為對質(zhì)粒2端進行Sanger測序確認(rèn)。

2. 到貨后3個月內(nèi)，由甲方單位***200個克隆進行復(fù)蘇活率驗證，復(fù)蘇活率不少于90%；

3. 到貨后3個月內(nèi)，由甲方單位***50個可復(fù)蘇克隆進行測序驗證，不少于85%的插入片段的氨基酸序列與提供的數(shù)據(jù)清單里的序列100%匹配。

4. 主要技術(shù)指標(biāo)完全滿足所述要求。

五. 維保

1. 維保從到貨日期開始起計算，不少于12個月；

2. 如在維保期內(nèi)發(fā)現(xiàn)有復(fù)蘇生長失敗的克隆，或者測序后氨基酸序列與數(shù)據(jù)提供的氨基酸序列有不匹配的克隆，可免費更換一次，若更換后序列仍與數(shù)據(jù)提供序列不匹配的按合同平均單價***款用于其它產(chǎn)品或服務(wù)的支付，同時該克隆不再重復(fù)提供；

附錄1基因名清單.xlsx

? ? ? ?如有意者請于2023.09.14.17:00之前與后勤服務(wù)科取得聯(lián)系 聯(lián)系人：***。聯(lián)系電話：***242