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***市人民醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“采購(gòu)人”）按照《中華人民共和國(guó)政府采購(gòu)法》和《政府采購(gòu)非招標(biāo)采購(gòu)方式管理辦法》等法律、法規(guī)的有關(guān)規(guī)定，于2021年1月20日（周三）15：00在***市人民醫(yī)院采購(gòu)辦公室會(huì)議室召開(kāi)院內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性磋商采購(gòu)會(huì)議。茲邀請(qǐng)符合相關(guān)資格條件、具有完成本項(xiàng)目能力的供應(yīng)商（以下簡(jiǎn)稱“投標(biāo)人”）參加。

1、項(xiàng)目?jī)?nèi)容及預(yù)算:

1.1采購(gòu)項(xiàng)目名稱《yyzc******市人民醫(yī)院科研服務(wù)院內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性磋商采購(gòu)目錄》

1.2 項(xiàng)目編號(hào)***n>預(yù)算金額***>156900

1.3付款方式：在磋商會(huì)議中,雙方協(xié)商確定。

2、供應(yīng)商資格條件：

2.1投標(biāo)人須在中國(guó)境內(nèi)注冊(cè)，能在國(guó)內(nèi)合法提供采購(gòu)內(nèi)容及其相應(yīng)服務(wù)的企業(yè)，持有效的營(yíng)業(yè)執(zhí)照、組織機(jī)構(gòu)***、稅務(wù)登記證、法定代表人授權(quán)書、法定代表人身份證明書、最近一年內(nèi)任意連續(xù)兩個(gè)月以上依法繳納稅收憑證和社會(huì)保險(xiǎn)費(fèi)繳費(fèi)憑證、產(chǎn)品用戶名單及銷售業(yè)績(jī)材料、產(chǎn)品介紹彩頁(yè)、信用記錄信息截圖（可通過(guò)“信用中國(guó)www***”、“中國(guó)政府采購(gòu)網(wǎng)www***”***道查詢，并將查詢結(jié)果截圖打印加蓋鮮章），對(duì)列入行賄記錄、失信被執(zhí)行人、重大稅收違法案件當(dāng)事人名單、政府采購(gòu)嚴(yán)重違法失信行為記錄名單的供應(yīng)商，拒絕參與本項(xiàng)目。

2.2本次采購(gòu)不接受聯(lián)合體投標(biāo)。

2.3 投標(biāo)人須對(duì)所有品目做完整報(bào)價(jià)***漏項(xiàng)。

2.4為了方便采購(gòu)人統(tǒng)計(jì)和比較，請(qǐng)各投標(biāo)人按附件表格的順序和樣式進(jìn)行報(bào)價(jià)***改動(dòng)附件表格格式。

3、注意事項(xiàng)

3.1凡與本項(xiàng)目有關(guān)的通知，***市人民醫(yī)院將在 “***市人民醫(yī)院網(wǎng)”發(fā)布公告的形式送達(dá)所有與通知有關(guān)的潛在投標(biāo)人，而不再用其他方式通知，請(qǐng)各投標(biāo)人注意隨時(shí)留意網(wǎng)站公告，因投標(biāo)人不留意網(wǎng)站公告，導(dǎo)致項(xiàng)目廢標(biāo)的由投標(biāo)人自負(fù)，采購(gòu)人不予承擔(dān)任何責(zé)任。

3.2 本采購(gòu)項(xiàng)目無(wú)需提前報(bào)名，不用購(gòu)買招標(biāo)文件，也不必繳納投標(biāo)保證金和履約保證金。

3.3 采購(gòu)會(huì)議開(kāi)始時(shí)，投標(biāo)人須提交針對(duì)本次采購(gòu)會(huì)議的密封完好的標(biāo)書（一正兩副）。

3.4本次所采購(gòu)項(xiàng)目都采用綜合評(píng)分法評(píng)審（評(píng)分辦法可電話索?。?/span>

4、采購(gòu)單位***

4.1 聯(lián)系人及電話：陳老師***；

4.2 采購(gòu)人地址：***省***市***區(qū)聶路21號(hào)。

***市人民醫(yī)院

2021年1月7日

附件1： 《yyzc******市人民醫(yī)院科研服務(wù)院內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性磋商采購(gòu)目錄》

一包詳細(xì)要求：

該標(biāo)包，投標(biāo)人需承諾完成以下工作，含檢測(cè)費(fèi)和試劑費(fèi)及其它相關(guān)費(fèi)用。

1.基因過(guò)表達(dá)及干擾病毒包裝

2. 過(guò)表達(dá)及干擾后CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖

細(xì)胞分組：

（1）過(guò)表達(dá)對(duì)照

（2）過(guò)表達(dá)

（3）干擾對(duì)照

（4）干擾對(duì)照

3. 過(guò)表達(dá)及干擾后相關(guān)基因表達(dá)變化檢測(cè)

細(xì)胞分組：

（1）過(guò)表達(dá)對(duì)照

（2）過(guò)表達(dá)

（3）干擾對(duì)照

（4）干擾對(duì)照

檢測(cè)10個(gè)基因表達(dá)變化：

4.免疫共沉淀檢測(cè)蛋白間相互作用

分組：

（1）過(guò)表達(dá)對(duì)照

（2）過(guò)表達(dá)

（3）干擾對(duì)照

（4）干擾對(duì)照

免疫共沉淀檢測(cè)

5. 熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RNA調(diào)控關(guān)系檢測(cè)

分組：

（1）miRNA過(guò)表達(dá)對(duì)照+靶基因結(jié)合位點(diǎn)野生型報(bào)告質(zhì)粒

（2）miRNA過(guò)表達(dá)+靶基因結(jié)合位點(diǎn)野生型報(bào)告質(zhì)粒

（3）miRNA過(guò)表達(dá)對(duì)照+靶基因結(jié)合位點(diǎn)突變型報(bào)告質(zhì)粒

（4）miRNA過(guò)表達(dá)+靶基因結(jié)合位點(diǎn)突變型報(bào)告質(zhì)粒

6.過(guò)表達(dá)及干擾后細(xì)胞功能檢測(cè)

分組：

（1）過(guò)表達(dá)對(duì)照

（2）過(guò)表達(dá)

（3）干擾對(duì)照

（4）干擾對(duì)照

建議按以下格式計(jì)算報(bào)價(jià)***，如果投標(biāo)人認(rèn)為還有其它的費(fèi)用或耗材，可在下表中增加，但總費(fèi)用不得超過(guò)預(yù)算。）

二包詳細(xì)要求：

一、大鼠背根***元細(xì)胞原代分離培養(yǎng)及鑒定

直接進(jìn)行SD正常大鼠背根***元細(xì)胞原代分離培養(yǎng)及鑒定。

大鼠背根***元細(xì)胞原代分離培養(yǎng)：24小時(shí)內(nèi)的新生 SD大鼠苯巴比妥（50mg /kg）腹腔注射麻醉后, 用大頭針將四肢固定俯臥于泡沫手術(shù)臺(tái)上, 用75%酒精消毒皮膚, 鋪無(wú)菌手術(shù)巾。經(jīng)背部正中切開(kāi)皮膚, 鈍性分離脊柱兩旁肌肉, 充分暴露棘突和橫突，從頸部椎管開(kāi)口插入顯微剪，交替在中線兩側(cè)將椎管平行剪開(kāi)，用顯微鑷去除椎板暴露脊髓，解剖顯微鏡下可見(jiàn)兩側(cè)椎間孔內(nèi)圓形透亮的脊神經(jīng)節(jié)，顯微鑷輕輕推脊髓兩側(cè)以松動(dòng)神經(jīng)節(jié)，然后慢慢將脊髓從椎管中提出（神經(jīng)節(jié)成串掛于脊髓兩側(cè)）轉(zhuǎn)入裝有5mLDF/12培養(yǎng)基的100mm培養(yǎng)皿中。在解剖顯微鏡下用鑷子逐個(gè)分離摘取神經(jīng)節(jié)，放入盛有4℃ DF-12培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，眼科剪將神經(jīng)節(jié)剪至0.5mm³大小的碎塊，并用培養(yǎng)液沖洗3遍。將碎塊移入加有0.25%胰蛋白酶+EDTA的離心管中，37℃培養(yǎng)箱中消化20min。吸出組織加入含有5% FS和5%馬血清的DF-12培養(yǎng)基離心管中作用10min，終止胰蛋白酶的消化，然后將漂浮的絮狀組織吸出，置入另一離心管，用含含有5%FS和5%馬血清的DF-12培養(yǎng)基漂洗2次，最后加入含有5%FS和5%馬血清的DF-12培養(yǎng)基，用吸管小心吹打，將其制成單細(xì)胞懸液，以106個(gè)/ml的密度接種于用多聚氨酸包被處理的24孔塑料細(xì)胞培養(yǎng)板中。于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

純化培養(yǎng)：培養(yǎng)48h后大部分DRG已經(jīng)貼壁, 全量換液并加入5μmol/L阿糖胞苷以***元細(xì)胞的增殖， 96h后全量換液，此后每48h半量換液。

鑒定：

（1）倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，并白光拍照。

（2）制作細(xì)胞片片，免疫熒光檢測(cè)NSE的分布情況（NSE

建議按以下格式計(jì)算報(bào)價(jià)***）：

大鼠背根***元細(xì)胞原代分離培養(yǎng)：白光拍照3樣：XX/張×3樣=XXX

免疫熒光3樣：XX/樣×3樣=XXX

熒光拍照3樣：XX/樣×3樣=XXX

二、ET-1/TRPA1/SP信***路在背根***元細(xì)胞中作用機(jī)制

實(shí)驗(yàn)分組：

①背根***元細(xì)胞

②背根***元細(xì)胞+ET-1

③背根***元細(xì)胞+TRPA1抑制劑

④背根***元細(xì)胞+ET-1+TRPA1抑制劑

取對(duì)數(shù)期期細(xì)胞，種于6孔板，進(jìn)行上述干預(yù)。48h后性下述檢測(cè)：

（1）每組2重復(fù)，全細(xì)胞膜片鉗檢測(cè)細(xì)胞膜電位變化；

（2）每組3重復(fù)，免疫熒光檢測(cè)ET-1、TRPA1、SP的表達(dá)情況；

（3）每組3重復(fù)，WB檢測(cè)ET-1、TRPA1、SP的表達(dá)情況。

（4）建議按以下格式計(jì)算報(bào)價(jià)***）：

細(xì)胞培養(yǎng)：XXX

膜片鉗檢測(cè)：XXX/樣×8孔=XXX

免疫熒光：XX/樣×12樣=XXX

熒光拍照：XX/樣×12樣=XXX

WB：檢測(cè)3個(gè)抗體，按M***-3-4，每個(gè)抗體1張膜，共需3張膜，每張膜XXXXXX

需要使用的試劑（下列信息僅供參考，中標(biāo)人根據(jù)實(shí)際檢測(cè)服務(wù)需要提供，直到項(xiàng)目完成）

NSE抗體 bs-1027Rbioss50μl

ET-1抗體 bs-7346Rbioss100μl

TRPA1抗體 ACC-037Biocompare若干

SP抗體 ab14184abcam50μl

TRPA1抑制劑 HY-N1500MCE5mg

內(nèi)皮素1重組蛋白 LMAI Bio若干